Категория
Биология
Тип
статья
Страницы
2 стр.
Дата
01.04.2013
Формат файла
.html — Html-документ
Архив
308448.zip — 2.28 kb
  • metody-opredelenija-n-koncevoj-aminokisloty_308448_1.html — 4.85 Kb
  • Readme_docus.me.txt — 125 Bytes
Оцените работу
Хорошо  или  Плохо


Текст работы

Методы определения
N-концевой аминокислоты

Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф.

Для определения природы N-концевой аминокислоты
предложен ряд методов, в частности метод Сэнджера (F. Sanger), основанный на
реакции арилирования полипептида 2,4-динитрофторбензолом (ДНФБ), что приводит к
образованию окрашенного в желтый цвет 2,4-динитрофенильного производного
N-концевой аминокислоты . Раствор полипептида обрабатывают ДНФБ, который
взаимодействует со свободной NH2-группой N-концевой аминокислоты пептида.

После кислотного гидролиза продукта реакции –
динитрофенилпептида только одна N-концевая аминокислота оказывается связанной с
реактивом в виде 2,4-динитрофениламинокислоты (стабильной при гидролизе). В
отличие от других образовавшихся при гидролизе полипептида свободных
аминокислот она желтого цвета. Ее идентифицируют методом хроматографии.

Для определения N-концевой аминокислоты значительно
более широко применяется фенилтиогидантоиновый метод Эдмана благодаря своей
высокой чувствительности и возможности многократного использования в одной и
той же пробе. Фенилизотиоцианат реагирует со свободной α-NH2-группой
N-концевой аминокислоты полипептида с образованием фенилтиокарбамоилпептида.

Обработка продукта реакции кислотой приводит к
циклизации и освобождению фенилтиогидантоина N-концевой аминокислоты, природу
которого устанавливают хроматографически. Укороченный на одну аминокислоту
полипептид подвергают дальнейшему анализу.



Ваше мнение



CAPTCHA