Категория
Биология
Тип
реферат
Страницы
13 стр.
Дата
26.03.2013
Формат файла
.html — Html-документ
Архив
272077.zip — 9.06 kb
  • frakcionirovanie-i-ochistka-belkov_272077_1.html — 31.29 Kb
  • Readme_docus.me.txt — 125 Bytes
Оцените работу
Хорошо  или  Плохо


Текст работы

Фракционирование и
очистка белков

Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф.

После достижения полной экстракции белков, т.е.
перевода белков в растворенное состояние, приступают к разделению –
фракционированию смеси белков на индивидуальные белки. Для этого применяют
разнообразные методы: высаливание, тепловую денатурацию, осаждение
органическими растворителями, хроматографию, электрофорез, распределение в
двухфазных системах, кристаллизацию и др.

Растворение белков в воде связано с гидратацией каждой
молекулы, что приводит к образованию вокруг белковой глобулы водных (гидратных)
оболочек, состоящих из ориентированных в определенной форме в пространстве
молекул воды. По химическим и физическим свойствам вода, входящая в состав
гидратной оболочки, отличается от чистого растворителя. В частности,
температура замерзания ее составляет –40°С. В этой воде хуже растворяются
сахара, соли и другие вещества. Растворы белков отличаются крайней
неустойчивостью, и под действием разнообразных факторов, нарушающих гидратацию,
белки легко выпадают в осадок. Поэтому при добавлении к раствору белка любых
водоотнимающих средств (спирт, ацетон, концентрированные растворы нейтральных
солей щелочных металлов), а также под влиянием физических факторов (нагревание,
облучение и др.) наблюдаются дегидратация молекул белка и их выпадение в
осадок.

Высаливание. При добавлении растворов солей щелочных и
щелочноземельных металлов происходит осаждение белков из раствора. Обычно белок
не теряет способности растворяться вновь в воде после удаления солей методами
диализа или гельхроматографии. Высаливанием белков обычно пользуются в
клинической практике при анализе белков сыворотки крови и других биологических
жидкостей, а также в препаративной энзимологии для предварительного осаждения и
удаления балластных белков или выделения исследуемого фермента. Различные белки
высаливаются из растворов при разных концентрациях нейтральных растворов
сульфата аммония. Поэтому метод нашел широкое применение в клинике для
разделения глобулинов (выпадают в осадок при 50% насыщении) и альбуминов
(выпадают при 100% насыщении).



Ваше мнение



CAPTCHA