Категория
Биология
Тип
реферат
Страницы
16 стр.
Дата
04.03.2013
Формат файла
.doc — Microsoft Word
Архив
161149.zip — 48.76 kb
  • vozmozhnosti-ionoobmennoj-xromatografii_161149_1.doc — 101.5 Kb
  • Readme_docus.me.txt — 125 Bytes
Оцените работу
Хорошо  или  Плохо


Текст работы

Реферат на тему:

Возможности ионообменной хроматографии.

Аффинная хроматография


Градиентная элюция

Вместо ступенчатой элюции может оказаться целесообразным
постепенно увеличивать концентрацию соли, то есть перейти на элюцию непрерывным
градиентом концентрации соли. Линейным или нелинейным - чтобы сократить разрыв
между пиками.

В ситуации, изображенной на рис. целесообразно использовать
"вогнутый" градиент концентрации соли: медленно нарастающей в области
ее малых значений и круто - в области больших концентраций. Это приблизит пик
белка 5 к остальным и тем самым сократит время хроматографии.

Я привел для примера способ выбора содержания соли в элюенте
в случае уже выбранного рН буфера. Аналогичный опыт можно поставить и для
исследования влияния рН при одной определенной концентрации соли. (Напомню, что
величина рН обязательно влияет на состояние ионогенных групп белка и,
следовательно, на распределение зарядов по поверхности белковой глобулы. В
случае использования слабого ионообменника от рН зависит и количество активных
ионов на матрице) Далее результаты обоих опытов можно разумно объединить,
варьируя (ступенчато или в градиенте) оба параметра. Возможно, что придется
сменить ионообменник или существенно удлинить колонку.

Если, несмотря на все усилия, разделить белки смеси в одном
хроматографическом опыте не удастся, то можно вышедшие из колонки фракции
неразделившихся белков объединить и внести в колонку с другим ионообменником
или использовать другой вид хроматографии.



Ваше мнение



CAPTCHA