Категория
Естествознание
Тип
курсовая работа
Страницы
4 стр.
Дата
17.08.2008
Формат файла
.rtf — Rich Text Format (Wordpad)
Архив
138730.zip — 88.85 kb
  • produkty-rekombinacii-xarakteristika-i-manipulirovanie_138730_1.rtf — 602.22 Kb
  • Readme_docus.me.txt — 125 Bytes
Рейтинг
5  из 10
Оценок
2
Оцените работу
Хорошо  или  Плохо


Текст работы

Продукты рекомбинации: характеристика и манипулирование Евгений
Diapsalmata
44
Продукты рекомбинации : характеристика и манипулирование
После отбора клонированных рекомбинантных молекул нужно охарактеризовать содержащуюся в них вставку . Для этого
необходимо ответить на несколько вопросов . Прежде всего - действительно ли рекомбинантная молекула содержит нужный сегмент ДНК ? Далее - включился ли сегмент целиком или только частично ? Соответствует ли он во всех деталях геномной ДНК, из которой происходит
? Является ли нужная последовательность функциональной ? Мы рассмотрим разные подходы к характеризации клонированных фрагментов ДНК . Прежде в
сего нужно очистить рекомбинант ную ДНК от ДНК клеток хозяина,
РНК и белков . Эта процедура довольно проста и включает экстракцию, физическое разделение компонентов и ферментативное расщепление РНК и белков . Так, плаз мидную ДНК можно отделить от геномной благодаря ее малому размеру и кольцевой структуре. Фаговую ДНК можно получить в свободном от клеточной
ДНК виде путем очистки фаговых частиц и последующего выделения из них ДНК .
макроструктура клонированной вставки
Для определения макроструктуры вставки сначала устанавливают ее размер и положение сайтов для рестриктирующих эндонуклеаз. Поскольку клонированные фрагменты геномной ДНК часто бывают длиннее или короче, чем интересующая нас область, необходимо также определить положение и длину нужного сегмента внутри вставки.
а . Размер вставки
Размер векторной молекулы обычно бывает известен, поэтому размер вставки можно оценить, зная полную длину рекомбинантной молекулы и предположив, что никакого делетирования во время клонирования не произошло. Размер многих рекомбинантных молекул можно определить с помощью



Ваше мнение



CAPTCHA