Категория
Биология
Тип
реферат
Страницы
27 стр.
Дата
12.08.2014
Формат файла
.html — Html-документ
Архив
1040547.zip — 17.01 kb
  • obnaruzhenie-edinichnyx-nukleotidnyx-zamen-v-dnk-rasshheplenie-rnkazoj-i-denaturirujushhij_1040547_1.html — 67.45 Kb
  • Readme_docus.me.txt — 125 Bytes
Оцените работу
Хорошо  или  Плохо


Текст работы

Обнаружение единичных нуклеотидных заменв ДНК: расщепление РНКазой и денатурирующий градиентный гель-электрофорез


Введение

Методыобнаружения нуклеотидных замен в геномной ДНК позволили исследователямразобраться в природе многих наследственных болезней человека. Эти методы даютвозможность идентифицировать специфические мутации, приводящие к заболеванию, атакже полиморфные участки ДНК, используемые в качестве маркеров в генетическоманализе. Благодаря развитию методов выявления нуклеотидных замен сталареальностью пренатальная диагностика многих наследственных болезней человека.Если ген, отвечающий за заболевание, известен, соответствующую мутацию можнообнаружить в геномной ДНК или в РНК при помощи блот-гибридизации сиспользованием меченых олигонуклеотидов в качестве гибридизационных зондов. Втом случае, когда мутировавшая нуклеотидная последовательность неизвестна,замены нуклеотидов можно определить по полиморфизму длины рестрикционныхфрагментов. ПДРФ обнаруживается по наличию или отсутствию сайта рестрикции вофрагменте геномной ДНК при гибридизации меченого ДНК-зонда с обработаннойрестриктазами геномной ДНК, расфракционированной по размеру в агарозном геле иперенесенной на мембранный фильтр. Этот метод оказался очень эффективным длявыявления как значимых мутаций, так и нейтрального полиморфизма в геномечеловека и других организмов. Однако большую часть мутаций и полиморфныхучастков генома не удается обнаружить с помощью анализа ПДРФ, посколькувероятность того, что замена нуклеотида изменит именно сайт рестрикции, низка.Так, например, многие точковые мутации гена р-глобина человека, вызывающиеталассемию, не изменяют сайтов рестрикции, а потому не могут бытьнепосредственно определены прн анализе ПДРФ. Кроме того, оказалось, что внекоторых участках генома млекопитающих полиморфизм незначителен, что крайнезатрудняет выявление в них ПДРФ даже при использовании большого числа различныхрестриктаз. Каждый из них позволяет



Ваше мнение



CAPTCHA